基于核酸的诊断、预后和治疗平台是很有前途的工具，由于其独特的特性，如热稳定性、抗变性和简单存储，它们正在取代旧的基于蛋白质的平台。一个好的疫苗平台应该是快速的、简单开发的、可再现的、热稳定的，并且可在降低开发成本和风险的情况下制造。 DNA 平台解决了其中的许多目标。
DNA 疫苗是 DNA 载体，例如细菌质粒、小环 DNA 或线性、共价闭合的简约表达构建体，它们包含至少一个编码目标抗原的真核表达盒。表达盒通常由真核启动子/增强子、抗原基因和 poly(A) 信号序列组成，它们对于抗原在真核细胞（例如肌肉细胞）中的表达至关重要。 DNA 疫苗在临床前研究中显示出令人信服的安全性和免疫原性。几种 DNA 疫苗目前已获准用于大型动物（如马）和小型动物（如鸡）的兽医使用。而印度基于ZyCoV-D 3 期试验的安全性、免疫原性和有效性结果，授予其紧急使用授权，这也是 DNA 疫苗的里程碑式进展。西尼罗河病毒 (WNV)、埃博拉病毒和马尔堡病毒以及 SARS-CoV-2 的 DNA 疫苗临床试验结果表明，抗体在免疫几周后在人体中产生。但在临床试验中也有很多免疫原性差的情况。目标抗原和构建、制剂和递送方法的优化似乎是 DNA 疫苗免疫原性的关键因素。
在过去几年中，DNA 疫苗领域取得了许多进展。 DNA 构建、递送和给药途径的进步以及分子佐剂的使用增强了 DNA 疫苗的免疫原性。 DNA 免疫有望彻底改变疫苗领域。 DNA 疫苗的制造和储存成本较低，使其成为全球疫苗接种的理想候选疫苗，即使在低收入国家也是如此。
质粒 DNA 是通过转基因细菌产生的，通常是大肠杆菌（E.Coli）。在临床前和临床规模下，遵循良好生产规范 (GMP) 生产质粒 DNA 需要仔细开发最佳和经济的商业工艺。细菌细胞在发酵条件下生长，通常在由化学成分确定的物质，如葡萄糖或甘油作为碳源、盐、维生素等组成的成分确定的或基本的细胞培养基中生长。发酵后，通过离心或微滤收集细菌细胞。然后采用化学、物理或机械方法进行细胞裂解。细胞裂解产生的裂解液含有细胞碎片、质粒 DNA 和可溶性杂质。切向流过滤等澄清技术用于从裂解液中去除固体。然后，采用污染物沉淀、质粒沉淀、层析纯化（阴离子交换层析，然后是疏水相互作用层析，有时是尺寸排阻层析）等几个纯化步骤来去除污染物（例如宿主蛋白、内毒素、RNA、基因组 DNA 和质粒 DNA 的线性和开环形式）。纯化的质粒 DNA 与赋形剂和佐剂一起配制，并通过除菌过滤器进行过滤。
小环 DNA 是通过在E.COli中诱导亲本质粒的分子内重组而产生的。例如，重组酶，如φC31整合酶，和限制酶（RE），如I-SceI，的表达由阿拉伯糖诱导基因表达系统诱导。重组酶介导其识别序列之间的位点特异性重组，产生两个不同的环状 DNA 分子（i）含有真核表达盒的小环 DNA 和（ii）由细菌骨架组成的迷你质粒（MP），MP 可被诱导的 RE 特异性降解。然后可以提取、纯化和制剂小环 DNA，类似于用于 DNA 质粒的方法。
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