强势来袭-出奇制胜的羟基磷灰石层析介质

羟基磷灰石是一种由钙和磷酸盐组成的生物材料，具有良好的生物相容性和生物活性，尤其制成的层析介质具有分离效率高，选择性、灵敏度高，重现性好，稳定性好等优点，在生物分子领域的分离纯化领域得到了广泛的认同。

分离纯化原理

羟基磷灰石层析介质具有独特的分离纯化原理，它同时具有阳离子交换作用和金属螯合作用。它的晶体结构中的磷酸根离子可以与带正电的蛋白质结合，表现出阳离子交换特性，可通过改变NaCl浓度来进行洗脱；而钙离子则与蛋白质上的自由羧基以金属螯合的方式结合，表现出金属螯合特性，可通过改变磷酸盐浓度进行洗脱。因此该层析介质既可以用磷酸钠单梯度洗脱，也可以采用NaCl梯度洗脱后以低浓度磷酸钠缓冲液平衡，再以磷酸钠浓度梯度洗脱的双梯度洗脱模型，以达到更好的去除杂质效果。

羟基磷灰石层析介质特性

羟基磷灰石因陶瓷化工艺不同分为2种类型：I型和II型。

I型是小孔径对蛋白质具有更大的保留，对酸性蛋白质有更大的动态载量，主要纯化大部分蛋白质。

II型是大孔径对抗体、核酸等大分子有更大的保留，动态载量更高，因此更适合纯化抗体和核酸。

羟基磷灰石层析介质的优点：

• 高动态载量、高流速、高产率；

• 更好的化学稳定性和机械强度，更长的寿命；

• 刚性结构，保证了其在PH>6.5的范围内使用，可用NaOH清洗；

• 良好的批次重现性，容易放大化；

• 可随意选用阳离子和金属螯合两个模式分离纯化蛋白或者其他分子。

羟基磷灰石层析介质的应用

1、在单克隆抗体纯化中的应用

单克隆抗体的纯化中用羟基磷灰石层析介质，可通过磷酸盐梯度捕获目标抗体，通过非磷酸盐体系（如氯化钠）梯度洗脱，精准地去除抗体聚集体、脱落的Protein A、内毒素等杂质，确保最终产品的纯度和收率。

2、在核酸纯化中的应用

羟基磷灰石层析介质可通过C位点与核酸上的磷酸基团作用，可直接用于纯化mRNA。不同于传统的阴离子交换层析介质，mRNA在羟基磷灰石层析介质上的保留时间随着mRNA碱基数的增加而增加，因此该层析介质对不同长短的核酸具有更好的分辨率。

3、在疫苗纯化中的应用

多糖类疫苗生产中的杂质主要是宿主细胞蛋白(HCP)、宿主细胞 DNA、色素和其他多糖类物质，羟基磷灰石层析介质可以特异的吸附HCP以及DNA等，从而提高多糖疫苗的纯度。 

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