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非洲猪瘟亚单位疫苗纯化工艺方案

2024. 09. 18
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非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒ASFV引起的一种高度传染性猪病,其发病特征是高烧、食欲不振、发绀、严重内出血,该病发病过程短,最急性和急性感染死亡率高达100%,世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,该病也是我国重点防范的一类动物疫情。


ASF于1920 年首次发现于非洲,而在2007年以来,非洲猪瘟在全球多个国家发生、扩散、流行,特别是俄罗斯及其周边东欧国家,并于2018年传播到中国,对生猪养殖造成重大打击,最终导致猪肉价格在后两年内连续攀升。

非洲猪瘟病毒结构特征

①大型双链DNA病毒;

②正二十面,直径约为200nm,呈同心圆状;

③病毒基因组长度在170-193kb,可编码150-200个病毒蛋白,包括68个结构蛋白和100多个非结构蛋白

非洲猪瘟亚单位疫苗纯化工艺方案

图1 非洲猪瘟病毒的结构[1]

非洲猪瘟疫苗

非洲猪瘟病毒发现已有100余年,但目前没有特效药,导致非洲猪瘟病毒疫苗开发滞后的主要因素在于非洲猪瘟病毒复杂的基因组结构和多变的基因型。病毒基因组可编码区域多;衣壳蛋白多且功能尚未完全明确,仍在持续研究中;免疫逃逸机制复杂,病毒致病机理仍不完全清楚。


目前疫苗研究的主要方向为减毒活疫苗以及重组亚单位疫苗,而减毒活疫苗在国内的研究以中国农业科学院哈尔滨兽医研究所为代表。重组亚单位疫苗方面,普莱柯生物工程股份有限公司与中国农业科学院兰州兽医研究所合作的亚单位疫苗,已向农业农村部提交兽药应急评价材料[2]。
重组亚单位的研究有蛋白如:p14、p22、p30、p34、p54、p72、C129R、DP96R、A104R等。
重组亚单位疫苗工艺路线
以下以重组亚单位(带His标签)疫苗为例,推荐使用博进生物的聚合物层析介质进行纯化。
非洲猪瘟亚单位疫苗纯化工艺方案
图2 重组亚单位疫苗工艺路线

博进生物的聚合物层析介质,基质为聚丙烯酸酯,采用柔性亲水修饰技术,形成聚合物-亲水材料的核壳结构,兼具琼脂糖良好生物相容性和聚合物的刚性结构,抗污染性良好,能耐受一定浊度的料液。在使用Ni亲和层析捕获目的蛋白后,使用阴离子层析进一步去除杂蛋白和内毒素,减轻疫苗注射后所产生的应激反应。

相关层析介质产品介绍

以下为博进生物的His标签蛋白纯化介质产品信息,采用该产品可快速从细胞破碎液/培养液中捕获His标签融合蛋白。博进生物的His标签蛋白纯化介质根据螯合配基的种类分为三类:亚氨基二乙酸(IDA)、次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺三乙酸(TED)。

非洲猪瘟亚单位疫苗纯化工艺方案

以下为博进生物的HPQ强阴离子的产品信息,HP系列产品的孔径为30nm,适合用于200kDa以下分子量的目的蛋白纯化。

非洲猪瘟亚单位疫苗纯化工艺方案

相关产品订购信息如下:

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参考来源:

[1] Wang N , Zhao D , Wang J ,et al.Architecture of African swine fever virus and implications for viral assembly[J].American Association for the Advancement of Science, 2019(6465).DOI:10.1126/SCIENCE.AAZ1439.

[2] 药时空.《非洲猪瘟疫苗的研发进展》.2024-07-19



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